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第十七期 TSK-GEL PW型凝膠色譜柱

2015年02月11日source:管理員
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TSK –gel PW 系列 GPC 凝膠柱填料是親水、剛性、化學和機械性能很好的球形多孔高聚物。使用 PH 值范圍是 2-12,可以使用含有 50%的混合有機溶劑為流動相。用于分離蛋白質、多肽、寡糖、DNA、RNA、水溶性的有機聚合物和其他水溶性大分子樣品等。


SKgel G-Oligo-PW 色譜柱

TSKgel G-Oligo-PW色譜柱是一款分析非離子型和陽離子型低聚物的專用色譜柱。由于受殘存陽離子基團的影響,該款色譜柱不推薦分離陰離子物質。TSKgel G-Oligo-PW色譜柱在聚乙二醇和聚環氧乙烷的校正曲線與TSKgel G2500PWXL相同。


TSKgel G-DNA-PW 色譜柱

TSKgel G-DNA-PW色譜柱可以分離分子量很大的多核苷酸,如:500-5,000 個堿基對中DNA,和RNA片段。雙鏈DNA片段排阻限要比rRNAS低,表明雙鏈DNA片段要比相同分子量的rRNAS有更大的分子結構。TSKgel G-DNA-PW色譜柱填料孔徑大于 1000A,粒徑為 10um。


TSKgel GMPW 和TSKgel GMPWXL色譜柱

當樣品分子量未知,或分布范圍很寬時。推薦使用TSKgel GMPW 和TSKgel GMPWXL這兩款混合填料色譜柱。TSKgel GMPW色譜柱裝填有G2500,G3000 和G6000PW型色譜柱填料。TSKgel GMPWXL色譜柱裝填有G2500,G3000 和G6000PWXL型色譜柱填料。二者提供了很寬的樣品分子量分離范圍。混合模式的色譜柱對葡萄糖和聚乙二醇的校正曲線很窄,線性范圍在 100-1,000,000Da。TSKgel GMPW系列色譜柱要比使用串聯色譜柱系統更節省時間和成本。


問:什么是色譜柱的再水化現象,如何避免?


答:TSK-GEL 液相色譜柱的脫水現象,可能是因為使用不當或長期放置保存過程中造成的。有些 TSK-GEL玻璃色譜柱中由于沒有氣密密封圈,這種情況下色譜柱會隨時間而易發生干燥現象。對于其他的所有種類色譜柱如不銹鋼或玻璃柱等,如果柱栓未擰緊或者使用過程中空氣意外進入到色譜柱中,均可能發生柱子干燥的情況。很容易就可以辨認到玻璃色譜柱出現的脫水現象,因為可以很容易地看到干燥的填充物與柱壁分離的現象。我們推薦采用下列步驟,以消除色譜柱的脫水現象:


1. 按照相反的流動方向將色譜柱連接到液相系統上;


2. 不要將色譜柱與檢測器相連。


3. 以推薦最大流速的一半流速,使用濾過的 20%乙醇超純水溶液進行色譜柱的過柱;注意:反相色譜柱需要使用 60%的乙醇。


4. 繼續重復上述程序,直到您確信色譜柱已經再水化處理完畢。再水化處理可能需要幾個小時的時間,這取決于色譜柱的尺寸大小;


5. 按照正確的流動方向將色譜柱連接到液相系統上;


6. 如果有機物不是正常流動相的一部分的話,要使用 3 個柱體積的超純水沖洗色譜柱以去除有機物。


7. 使用上樣緩沖液進行柱平衡(通常使用 3-5 個柱體積);


8. 使用 QC 測試方法評價柱子的性能,以確保色譜柱能夠正常使用。


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