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第十五期 TOSOH TSK-GEL 凝膠色譜柱

2015年02月11日source:管理員
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凝膠過濾色譜,又稱凝膠滲透色譜。 一般來說,在生物化學(xué)界中常用的名稱是凝膠過濾色譜(GFC),在高分子化學(xué)界中常用的名稱是凝膠滲透色譜(簡稱 GPC)。


TOSOH 公司始建于 1935 年,原名東洋曹達(dá)工業(yè)株式會社(TOYO SODA),其產(chǎn)品優(yōu)異的產(chǎn)品性能,在生物制藥,生物技術(shù)等領(lǐng)域享有盛譽。


TSK 凝膠柱廣泛應(yīng)用于制藥和生物工程中蛋白質(zhì),多肽,多糖,寡糖,DNA,RNA 等生物高聚物的分離,純化或分子量的測定。



TSK-GEL SW 系列色譜柱的填料以剛性的球型硅膠為基質(zhì),在其表面通過共價鍵化學(xué)鍵合親水基團(tuán)而成。其 pH 適用范圍為 2.5-7.5,可以使用與水完全互溶的有機溶劑,如乙腈、丙酮、甲醇或乙醇等。適合分析分離蛋白質(zhì)和多肽類樣品。


TSK-GEL SW 系列色譜柱的選擇指南



未知分子量的樣品


TSKgel G3000SWXL是理想的摸索條件的色譜柱。

如果感興趣的蛋白質(zhì)的洗脫接近排除體積,下一步應(yīng)該嘗試使用G4000SWXL。相反,如果感興趣的

蛋白質(zhì)洗脫接近色譜末端,嘗試使用G2000SWXL。

蛋白質(zhì)(一般情況)

通過校正曲線或者評估蛋白質(zhì)的分子量選擇恰當(dāng)?shù)目壮叽纾^而可以選擇出 TSK-GEL SWxl 系列色譜

柱中的一款使用。

單克隆抗體

TSKgel G3000SWXL通常用于質(zhì)量控制。

樣品量有限或者低濃度時,可以使用 TSK gel SuperSW 3000。

多肽

TSKgel G2000SWXL是多肽分析的首選。

樣品量有限或者低濃度時,可以使用 TSK gel SuperSW 2000。


注意事項

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安裝說明

*流向*

安裝使用時注意色譜柱上標(biāo)明的流向箭頭,安裝反了會降低色譜柱柱效。

*去處氣泡*

從儀器上安裝和拆卸色譜柱時一定要注意不要讓氣泡進(jìn)入,安裝時要去除管路中的氣泡。

*安裝*

當(dāng)進(jìn)樣端螺母擰下,有溶劑從接口溢出,可將色譜柱小心的與儀器連接,這樣做可以保證沒有氣泡進(jìn)入柱

子.如果沒有黨課從接處流出,將柱子反接,用低于 0.5ml/min 的低流速走柱,趕走氣體。確定當(dāng)脫氣的

溶劑從色譜柱進(jìn)樣口流出后,按流向箭頭所示接柱。

*正確使用*

柱子安裝完成后,進(jìn)行工作時要注意避免高壓力和大流速,同時壓力的快速變化也要避免。

保存說明

*日常使用*

如果柱子每天都使用,不需要將它從儀器上取下,流動相可在柱子中保留過夜。

*短期保存*

將色譜柱從儀器上取下,封緊保護(hù)螺帽。保存 4-30 溫度度,不得低于 4 度。

*長期保存*

用水溶液或含 0.05%的疊氮化鈉緩沖液保存。保存溫度 4-30 度,不得低于 4 度。不能受陽光直射。

溶劑

*替換溶劑*

色譜柱中原廠保存的溶劑是 0.1M 的磷酸緩沖液含 0.05%的疊氮化鈉和 0.1M 的硫酸鈉。若流動相要改變,

可用低于 0.5ml/min 的流速走柱。若要用有機溶劑替換,先用蒸餾水過渡,再用有機溶劑走柱,注意濃度

梯度,有機溶劑濃度的快速變化會使柱效降低。

*PH 范圍*

SW 系列色譜柱的溶劑 PH 范圍在 2.5-7.5。

*溶劑范圍*

SW 系列所用的溶劑除了水溶液和緩沖液,還可以使用親水性的有機溶劑,包括甲醇,乙腈以及它們的水

溶液。

*清洗溶液*

PH 較低(如: PH 3.0),濃度較高的鹽溶液(如:0.5M Na2SO4);

添加水溶性有機物(MeOH,ACN,EtOH,10%-20%)的極性緩沖液;

SDS(0.1%),尿素(8M)或胍(6M)的緩沖溶液。注意:這些試劑很難被去除。它們需要使用 20-40 個柱體積

的 20%ACN 進(jìn)行沖洗。因此,只有當(dāng)先前的清洗方法無效時才選擇使用本方法。

流速

*推薦流速*

SW 色譜柱的推薦流速在 0.5-1.0ml/min,最大流速是 1.2 ml/min,柱子流速不能超過最大流速。?

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