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第十七期 TSK-GEL PW型凝膠色譜柱

2015年02月11日來(lái)源:管理員
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TSK –gel PW 系列 GPC 凝膠柱填料是親水、剛性、化學(xué)和機(jī)械性能很好的球形多孔高聚物。使用 PH 值范圍是 2-12,可以使用含有 50%的混合有機(jī)溶劑為流動(dòng)相。用于分離蛋白質(zhì)、多肽、寡糖、DNA、RNA、水溶性的有機(jī)聚合物和其他水溶性大分子樣品等。


SKgel G-Oligo-PW 色譜柱

TSKgel G-Oligo-PW色譜柱是一款分析非離子型和陽(yáng)離子型低聚物的專用色譜柱。由于受殘存陽(yáng)離子基團(tuán)的影響,該款色譜柱不推薦分離陰離子物質(zhì)。TSKgel G-Oligo-PW色譜柱在聚乙二醇和聚環(huán)氧乙烷的校正曲線與TSKgel G2500PWXL相同。


TSKgel G-DNA-PW 色譜柱

TSKgel G-DNA-PW色譜柱可以分離分子量很大的多核苷酸,如:500-5,000 個(gè)堿基對(duì)中DNA,和RNA片段。雙鏈DNA片段排阻限要比rRNAS低,表明雙鏈DNA片段要比相同分子量的rRNAS有更大的分子結(jié)構(gòu)。TSKgel G-DNA-PW色譜柱填料孔徑大于 1000A,粒徑為 10um。


TSKgel GMPW 和TSKgel GMPWXL色譜柱

當(dāng)樣品分子量未知,或分布范圍很寬時(shí)。推薦使用TSKgel GMPW 和TSKgel GMPWXL這兩款混合填料色譜柱。TSKgel GMPW色譜柱裝填有G2500,G3000 和G6000PW型色譜柱填料。TSKgel GMPWXL色譜柱裝填有G2500,G3000 和G6000PWXL型色譜柱填料。二者提供了很寬的樣品分子量分離范圍。混合模式的色譜柱對(duì)葡萄糖和聚乙二醇的校正曲線很窄,線性范圍在 100-1,000,000Da。TSKgel GMPW系列色譜柱要比使用串聯(lián)色譜柱系統(tǒng)更節(jié)省時(shí)間和成本。


問(wèn):什么是色譜柱的再水化現(xiàn)象,如何避免?


答:TSK-GEL 液相色譜柱的脫水現(xiàn)象,可能是因?yàn)槭褂貌划?dāng)或長(zhǎng)期放置保存過(guò)程中造成的。有些 TSK-GEL玻璃色譜柱中由于沒(méi)有氣密密封圈,這種情況下色譜柱會(huì)隨時(shí)間而易發(fā)生干燥現(xiàn)象。對(duì)于其他的所有種類色譜柱如不銹鋼或玻璃柱等,如果柱栓未擰緊或者使用過(guò)程中空氣意外進(jìn)入到色譜柱中,均可能發(fā)生柱子干燥的情況。很容易就可以辨認(rèn)到玻璃色譜柱出現(xiàn)的脫水現(xiàn)象,因?yàn)榭梢院苋菀椎乜吹礁稍锏奶畛湮锱c柱壁分離的現(xiàn)象。我們推薦采用下列步驟,以消除色譜柱的脫水現(xiàn)象:


1. 按照相反的流動(dòng)方向?qū)⑸V柱連接到液相系統(tǒng)上;


2. 不要將色譜柱與檢測(cè)器相連。


3. 以推薦最大流速的一半流速,使用濾過(guò)的 20%乙醇超純水溶液進(jìn)行色譜柱的過(guò)柱;注意:反相色譜柱需要使用 60%的乙醇。


4. 繼續(xù)重復(fù)上述程序,直到您確信色譜柱已經(jīng)再水化處理完畢。再水化處理可能需要幾個(gè)小時(shí)的時(shí)間,這取決于色譜柱的尺寸大小;


5. 按照正確的流動(dòng)方向?qū)⑸V柱連接到液相系統(tǒng)上;


6. 如果有機(jī)物不是正常流動(dòng)相的一部分的話,要使用 3 個(gè)柱體積的超純水沖洗色譜柱以去除有機(jī)物。


7. 使用上樣緩沖液進(jìn)行柱平衡(通常使用 3-5 個(gè)柱體積);


8. 使用 QC 測(cè)試方法評(píng)價(jià)柱子的性能,以確保色譜柱能夠正常使用。


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